超微量分光光度計(jì) -測(cè)量原理 分光光度法則是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。常用的波長(zhǎng)范圍和對(duì)應(yīng)的儀器分別為:
1.200~400nm的紫外光區(qū)紫外分光光度計(jì)
2.400~760nm的可見光區(qū)可見光分光光度計(jì)
3.2.5~25μm(按波數(shù)計(jì)為100000px<-1>~10000px<-1>)的紅外光區(qū)。紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。
單色光輻射穿過被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長(zhǎng)度)成正比,其關(guān)系如下式:
A=-log(I/IO)=-lgT=kLc
物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng),以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后,可用同樣條件將該供試品配成溶液,測(cè)定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測(cè)定,故又稱比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測(cè)定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。
超微量分光光度計(jì)
1. 所需樣品體積小,僅需1~2μL
2. 不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測(cè)平臺(tái)上,測(cè)量時(shí)樣品自動(dòng)形成液柱,檢測(cè)完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測(cè)平臺(tái)上擦拭干凈即可;
3. 具有1mm和0.2mm兩個(gè)光程(電機(jī)控制自動(dòng)選擇),樣品無需稀釋,測(cè)量范圍可達(dá)到常規(guī)分光光度計(jì)的50倍.
4. 氙氣閃光燈為燈源,壽命長(zhǎng),性能穩(wěn)定
5. 不需要預(yù)熱,可隨時(shí)檢測(cè)
6. 顯示吸光度值的同時(shí),程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)
7. 體積小:相當(dāng)于一本字典大小,僅占16.5厘米實(shí)驗(yàn)室空間。
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